miRNA定量
进行一次逆转录即可实现所有目标miRNA的测定？没错，采用加尾法，一次逆转录就可以得到全部miRNA对应的cDNA。
我们知道，真核生物mRNA都是有poly-A尾巴的，这样Oligo-dT（逆转录引物）就很容易结合到mRNA上来合成cDNA了。
miRNA就缺了poly-A尾巴，怎么办呢？在逆转录试剂盒中加入poly-A聚合酶，先给它们加上一串poly-A尾巴，然后用带有一段通用序列的Oligo-dT和逆转录酶来合成cDNA。这样一来，一次逆转录反应就合成了所有miRNA以及其他snRNA、mRNA对应的cDNA，接下来想用来检测什么都可以！
您只需要提供1μg合格的total RNA，就可以对所有感兴趣的miRNA进行检测。这既可避免茎环法（各目标miRNA单独逆转录）带来的逆转录效率、加样误差等方面的影响，还可节约多条特异逆转录引物和多次逆转录反应的花费，可谓一举两得，何乐而不为？
均一化cDNA文库
基因转录水平上的巨大差异常常给文库筛选和 分析 带来障碍，采用均一化文库技术可有效克服这一问题。 均一化 cDNA 文库具有以下4方面的优点：第一，在经济上具有广泛的应用空间，可以节约大量试验成本。第二，增加克隆低丰度 mRNA 的机会，适用于 分析 各种发育阶段或各种组织的基因表达及突变检测。第三，与原始丰度的 mRNA 拷贝数相对应的 cDNA 探针与均一化的 cDNA 文库作杂交，可以估计出大多数基因的表达水平及发现一些组织特异的基因。而以往的文库构建，忽略了 mRNA 丰度的影响。第四，可以用于遗传图谱的制作和进行大规模的原位杂交，作为优化的文库系统还可以用于大规模的测序。
现在，在构建均一化的cDNA 文库中至少有2种主要的观点：一种是基于复性动力学的原理，高丰度的cDNA 在退火条件下复性的速度快，而低丰度的cDNA 复性要很长时间，从而可以通过控制复性时间来降低丰度；另一种是基于基因组 DNA 在拷贝数上具有相对均一化的性质，通过cDNA 与基因组DNA 饱和杂交而降低在文库中高拷贝存在的cDNA 的丰度。第一种方法的掌握对技术的要求比较高，对多数人而言需要多次摸索才能找到最适条件；而后一种方法易于掌握，但有 研究 者根据复性动力学的原理也提出了其不利因素，即采用基因组DNA 饱和杂交的方法会因为低拷贝的表达基因拷贝数少而无法被杂交上。
DSN 是最近发现的一种热稳定核酸酶。该酶能够选择性降解双链DNA 和DNARNA杂交体中的DNA，对单链核酸分子几乎没有作用。同目前常用的均一化技术相比，基于DSN 的均一化技术操作步骤简单， 所需要的起始材料也比较少， 具有较好的应用前景。
上海欧易生物医学科技有限公司开展miRNA定量检测服务已经近三年时间，服务项目几百个。拥有自己的miRNA引物库（人类），对其他物种可以自行设计引物，检测样品范围广，包括：细胞、组织、血液、血浆、血清、细胞培养上清等，操作规范，时间可控，为广大 研究 工作者提供了良好的便利。
同时，其作为国内cDNA文库构建的主流服务供应商，在长期稳定的实验服务过程中积累了丰富的经验，已经成功构建包括动物、植物、细菌等几十个物种的cDNA文库。他们基于双链特异性核酸酶的先进cDNA文库均一化技术，能减低高丰度表达基因100倍以上，有效富集低丰度表达基因，从而降低冗余率。
网站地图
- 单位信息
- 单位地址：北京市西城区国宏大厦23层
邮政编码：100038
开户银行：北京建行万丰支行
银行账号：1100 1042 4000 5300 0736
联 系 人：李春风 梁娜
联系电话：010-65067990 65067996
图文传真：010-65066990
单位信箱：vip@cmrn.com.cn
全国统一咨询电话：4008790365
- 产品分类
- 煤炭
- 石油
- 天然气
- 铁矿
- 金属矿
- 非金属矿
- 农副食品
- 食品
- 方便食品
- 调味品
- 饮料
- 酒类
- 烟草
- 纺织
- 服装
- 鞋帽
- 皮革羽绒
- 木材
- 家具
- 造纸
- 纸制品
- 印刷
- 文体用品
- 玩具
- 石油加工
- 炼焦
- 化学原料
- 化肥
- 农药
- 涂料
- 合成材料
- 化学试剂
- 日化
- 化学药品
- 中药
- 兽药
- 生物制药
- 卫生材料
- 化纤
- 橡胶
- 轮胎
- 塑料
- 非金属
- 水泥
- 玻璃
- 陶瓷
- 耐火材料
- 钢铁
- 有色金属
- 金属制品
- 集装箱
- 不锈钢
- 通用设备
- 锅炉
- 机床
- 轴承
- 齿轮
- 衡器
- 钢铁铸件
- 专用设备
- 采矿设备
- 石油钻采
- 工程机械
- 冶金设备
- 炼油设备
- 橡胶设备
- 塑料设备
- 模具
- 印刷设备
- 制药设备
- 纺织机械
- 医疗器械
- 环保设备
- 交通运输
- 铁路
- 汽车
- 摩托车
- 船舶
- 电气
- 电机
- 输配电
- 电线电缆
- 电池
- 照明器材
- 通信设备
- IT
- 电子元件
- 仪器仪表
- 光学仪器
- 眼镜
- 工艺品
- 回收
- 电力
- 燃气供应
- 水务
- 汽车零部件
- 家电
- 相关文章
-
- 引领全球制药的QSORB冻干闪释技术
- “减压智能快速腌制技术”颠覆传统
- 好想你突破冻干技术 “清菲菲”惊艳上市
- 真空热处理技术
- 欧盟新技术能减小肉制品硝酸盐
- 辐照技术应用食品灭菌
- 双核臭氧杀菌技术
- 新式卤化物技术绿色无害 未来或将应用于合成制造
- 乳清蛋白新技术诞生
- 铝检测技术取得新突破
关于我们
-
联系我们
-
网站地图
-
企业客户
中经市场研究网 © 版权所有 北京中经纵横信息咨询中心
相关搜索：可行性报告大纲，可研报告盖章，可行性报告，可研报告，编写可研报告，可行性报告内容批复，可行性分析怎么写，可行性报告编写，立项可行性报告
地址：北京市西城区木樨地北里国宏大厦23层
电话：010-65067990 65067996 传真：010-65066990 信箱：
cn@cmrn.com.cn
京ICP备07500824号
<script type="text/javascript">var _bdhmProtocol = (("https:" == document.location.protocol) ? " https://" : " http://");document.write(unescape("%3Cscript src='" + _bdhmProtocol + "hm.baidu.com/h.js%3Fe88d53b3e2ff5ae56c49bd329126f0bf' type='text/javascript'%3E%3C/script%3E"));</script>